请学生物的同学帮忙介绍一下“PCR”

在real-time Q-PCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲 线。

聚合酶链式反应简称PCR（英文全称：Polymerase Chain Reaction）， 聚合酶链式反应 具体内容点击： 聚合酶链式反应，简称PCR。

基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。

PCR全称多聚酶链式反应，原理是DNA的体外扩增。具体来说：在EP管里加入DNA、合成原料（dNTP、引物）、耐热的DNA聚合酶（taq）后，放入PCR仪，PCR仪会利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制的目的。

免疫PCR的制作方法

1、免疫PCR制作方法详细步骤如下：首先，制备生物素化DNA，通过噬粒 BLuescript skt与生物素标记的M13引物进行PCR扩增，得到包含T3和T7引物序列的280bp片段。接着，免疫PCR操作包括以下步骤：包被：将抗原（BSA）用包被缓冲液稀释后，加入微滴板，4℃过夜后，用洗涤液洗涤三次。

2、加入微滴板中（45μl孔），4℃过夜（约15h），用洗涤液洗板3次×5min。2）封闭：每孔加200μl含5%脱脂奶及变性鲑鱼精子DNA（1mg/ml）、0.1mmol/L EDTA的20mmol/L Tris-Hcl（pH5）（含150mmol/L NaCl缓冲液，37℃温育80min，洗板数次。

3、免疫PCR（Polymerase Chain Reaction， PCR）是一种关键的分子生物学技术，其主要程序分为几个步骤以实现特定基因的扩增和检测。首先，实验开始于抗原与生物素化的抗体结合，这一过程产生的是抗原-生物素化抗体复合物。

4、对于吸附性差的抗原，可能需要改进免疫PCR方法以适应检测。为了提高精确性和敏感性，一些方法使用专用的固相板或微孔板进行PCR扩增，而链亲合素作为连接分子的免疫PCR方法，如Hong Zhou等的研究，通过游离方式结合，增加了重复性和敏感性。

实时荧光定量PCR的原理

所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，较后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。

所谓实时荧光定量PCR技术 ，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

荧光定量pcr原理是：在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。

荧光定量PCR原理：随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。

所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中，引入了一种荧光化学物质，随着 PCR 反应的进行， PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。

实时荧光定量PCR是一种利用荧光信号监测PCR进程并进行定量分析的技术。其核心概念是Ct值，即当荧光信号达到设定阈值（荧光域值，通常设定为前15个循环标准偏差的10倍）时经历的循环数。Ct值与起始模板的拷贝数有密切关系，拷贝数越多，Ct值越小。